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大鼠急性酒精性肝损伤模型的探究

时间:2022-03-09分类:基础医学

  摘要:目的 探索一种相对高效可靠的方法制作大鼠酒精性肝损伤模型。 方法 16只雄性SD大鼠随机分为2组。 对照组饮用生理盐水;实验组饮用52%的红星二锅头14天,记录大鼠情况;处死后对肝组织和血液进行检查。结果 14天后,实验组与肝功相关的“前胆红素、直接胆红素、前白蛋白、视黄醇结合蛋白和总胆汁酸”5个指标均出现明显异常,肝脏均出现肿大,肝窦变窄,表面可见白色点状变化。结论 该模型操作简便,发病过程与临床类似,为公共卫生领域寻找有效的针对酒精性肝损伤的防治方法以及药物治提供较好模型。

  关键词:急性;酒精性;肝损伤;动物模型;大鼠

  酒精滥用与依赖日益严重已成为世界性公共卫生问题[1]。 长期大量饮酒易导致酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD),早期表现为脂肪肝,可发展为酒精性肝炎、肝纤维化及肝硬化[2]。不同的酒精对肝脏的损伤也有差异[3]。暴食和禁食对肝脏的损伤更为严重,严重酗酒可造成广泛肝细胞坏死甚至肝衰竭,选择与人类 ALD 相似的动物模型对研究其发病机制具有重要意义[4]。急性酒精性肝损伤是因短时间连续大量饮用含乙醇的饮品所导致的肝脏损伤性病变,严重时能导致酒精中毒死亡。酒精,这一因素已经成为了在病毒性肝炎之后的,导致肝损伤的第一罪魁祸首[5]。因此,酒精性肝损伤模型对酒精性脂肪肝的防治具有重要意义。

  1材料与方法

  1.1 材料

  清洁级的SD雄性大鼠16只(均来自于西南医科大学城北实验动物中心),空腹体重180-260g。

  1.2主要试剂

  52%红星二锅头(北京正通荣合商贸有限公司);氯化钠注射液(四川美文康佳乐药业股份有限公司);甲醛溶液(成都金山化学试剂有限公司)缓冲液。

  1.3实验环境

  实验地点为西南医科大学城北校区动物实验中心2楼11实验室,湿度40%~70%,室温20℃~25℃,大鼠饲养在无毒、耐高温、耐高压、耐腐蚀的饲养笼中,每天更换饲料,隔日更换垫料,自由饮用干净水。

  1.4 实验方法

  1.4.1动物分组及处理

  使用大鼠16只,任意分成两个组(每组8只),作为实验组和空白对照组。实验组每天禁食不禁水十个小时(早上8时禁食,下午6点灌胃)后给予浓度为52%的红星二锅头,1ml/100g.d, 空白对照组则使用1ml/100g.d的生理盐水灌胃,两个小时后恢复进食。

  1.4.2观察记录

  每日上、下午各观察一次,实验条件同前,连续观察14天,记录动物的外观、饮食、行为、活动度、空腹体重、有否死亡等情况。

  1.4.3标本采集与处理

  在第15天的时候,采用颈椎脱臼致死法对大鼠进行处死,取出两个小组的大鼠的肝,收集血液之后取肝组织放在10%中性福尔马林中固定,等着做组织病理、免疫组织化学检测。随后在两个小组的大鼠肝左叶同一部位取一大鼠块肝组织,缓冲溶液和10%甲醛溶液固定。经過常规脱水、石蜡包埋、切片,行HE染色后,在光镜下观察。评估肝脏的脂肪变性程度。并将采集的血液进行生化分析。

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