【摘 要】 目的 建立气相色谱法测定外伤如意膏中冰片含量的方法。方法 采用WAX PEG-20M毛细管柱,柱温为140 ℃,进样口温度为230 ℃,检测器温度为250 ℃,流速为1.0 mL/min。结果 线性范围为0.051 38～0.513 8 mg,平均回收率为96.0%,RSD=1.26。结论 该方法简便、易操作,能有效控制该产品的质量。
【关键词】 外伤如意膏;龙脑;气相色谱法;含量测定
外伤如意膏由紫草、大黄、地榆、栀子、冰片等组成,具有清热解毒、凉血散瘀、消肿止痛、止血生肌的功效,用于跌打撞伤、骨折脱臼、筋伤积瘀、皮肉损伤化脓、烫火伤等。为完善、提高本产品的质量标准,确保制剂的质量和疗效,我们对其含量测定方法进行了研究[1]。
1 仪器与试药
安捷伦8960N气相色谱仪,FID检测器。龙脑(批号155987)、水杨酸甲酯(批号110707-200710)购于中国药品生物制品检定所;外伤如意膏为本公司产品。所用试剂均为分析纯。
2 色谱条件
WAX PEG-20M毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);柱温：140 ℃;进样口温度：230 ℃;检测器温度：250 ℃;载气流速：1.0 mL/min;理论塔板数按内标峰计应不低于3 000。
3 方法与结果
3.1 溶液的制备
3.1.1 内标液
取水杨酸甲酯适量,精密称定,加无水乙醇制成每1 mL含5 mg的溶液,作为内标溶液。
3.1.2 对照液
取龙脑对照品50 mg,置50 mL量瓶中,加无水乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制成对照液。
3.1.3 校正因子的测定
精密量取对照液1 mL,置10 mL量瓶中,精密加入内标溶液1 mL,加无水乙醇至刻度,摇匀,作为对照品溶液。取1 μL注入气相色谱仪,计算校正因子为0.633 5, RSD=1.2%[2]。
3.1.4 供试品溶液的制备
取本品5支,内容物混匀,取1 g,精密称定,置锥形瓶中,精密加无水乙醇10 mL,超声处理(功率350 W,频率50 kHz)10 min,放冷,再称定重量,用无水乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精取续滤液5 mL,置10 mL容量瓶中,精密加入1 mL内标溶液,无水乙醇稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
3.1.5 阴性对照溶液的制备
按处方量取除冰片外的其他药材,依法制成阴性样品,再按供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液。
3.2 专属性考察
按照色谱条件,将对照品溶液及阴性样品溶液各进样1 μL,龙脑与内标物水杨酸甲酯可分离,空白样品在龙脑与内标物的位置无相应峰出现。结果见图1。
3.3 线性范围的考察
精密吸取对照品溶液0.5、1、2、3、4、5 mL,分别置于10 mL量瓶中,各精密加入内标溶液1 mL,用无水乙醇稀释至刻度,摇匀,各取1 μL进样,测定峰面积。以对照品溶液浓度为横坐标,以内标溶液峰面积与对照品峰面积之比为纵坐标,得到回归方程：Y=0.57 506X-0.010 516 8,r=0.999 8,线性范围为0.051 38～0.513 8 mg。
3.4 稳定性试验
取同一批号的供试品溶液,在0、1、2、4、6、8 h分别进样测定,结果峰面积的RSD=0.27%。
3.5 重复性试验
精密吸取外伤如意膏同一份供试品溶液1 μL,重复进样5次,按测定方法测定,样品中平均含龙脑2.45 mg/g,其RSD=0.33%。
3.6 加样回收率试验
称取已测定含量的样品1 g(批号UE0001,含量2.45 mg/g),共5份,分别精密称定,置锥形瓶中,同时加入一定量的龙脑对照品,按供试品溶液的制备方法制备,测定,结果见表1。表1 加样回收率试验结果(略)
3.7 样品测定
分别取不同批次的外伤如意膏约1 g,按供试品溶液制备方法制备,分别吸取对照品溶液及供试品溶液各1 μL,注入气相色谱仪,测定结果见表2。表2 龙脑含量测定结果(略)
4 讨论
笔者曾采用无水乙醇与醋酸乙酯两种溶液提取供试品,无水乙醇破坏乳化的效果较好,因而选取无水乙醇作为提取溶剂。本法操作简单,对照品与内标物分离度符合要求,杂质对测定无干扰,灵敏度高,重复性好,可有效控制外伤如意膏的质量。
【参考文献】
[1] 肖树雄.中药现代质量标准研究(下册)[M].广州：羊城晚报出版社, 2004.518.
[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社,2005.98.
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